Определение желчных пигментов
Билирубинурия – наличие билирубина в моче. Билирубин является конечным продуктом обмена желчных пигментов. В норме билирубин в моче не выявляется. Билирубин относится к группе хромопротеинов и является конечным продуктом распада гемоглобина, миоглобина, цитохрома, каталазы и других веществ. В плазме билирубин связывается альбумином, образуя комплексное соединение (неконъюгированный, свободный, или непрямой билирубин), который не проходит почечный фильтр.
Неконъюгированный билирубин нерастворим в воде, не реагирует с диазореактивом Эрлиха. Неконъюгированный билирубин поглощается гепатоцитами. В гепатоците он соединяется с активированной глюкуроновой кислотой. Образуются билирубинмонои билирубиндиглюкурониды, которые представляют собой конъюгированный билирубин. Конъюгированный билирубин водорастворим, реагирует с диазореактивом и проходит почечный фильтр. Конъюгированный билирубин выводится с желчью последовательно в желчные капилляры, ходы, желчный пузырь, тонкий кишечник, где происходит дальнейшее преобразование билирубина с образованием уробилиногена, мезобилирубиногена, мезобилирубина и других соединений.
Уробилиноген в двенадцатиперстной кишке всасывается энтероцитами и с током крови воротной вены возвращается в печень, где полностью окисляется до дипирролов. Остальные производные билирубина в толстой кишке под влиянием редуцирующей кишечной флоры превращаются в стеркобилиноген и выделяются с калом. Небольшая часть стеркобилиногена в толстой кишке всасывается в кровь и через геморроидальные вены и нижнюю полую вену поступает в почки и выводится с мочой. Таким образом, в нормальной моче содержится небольшое количество (следы) стеркобилиногена (стеркобилина), который в моче принято называть уробилиногеном (уробилином).
Большинство методов определения билирубина в моче основаны на превращении билирубина под действием окислителей в зеленый биливердин или пурпурно-красные билипурины, которые в смеси с биливердином дают синее окрашивание.
Клиническое значение
Билирубинурия наблюдается главным образом при поражении паренхимы печени (паренхиматозные желтухи) и при механических затруднениях оттока желчи (обтурационные, механические желтухи), сопровождающихся увеличением содержания билирубина в крови. При гемолитической желтухе реакция на билирубин в моче отрицательна, что имеет диагностическое значение при дифференциальной диагностике желтух.Определение уробилиноидов
Причины уробилинурии
Нарушение детоксикационной функции печени, когда последняя теряет способность разрушать поступающий из кишечника мезобилиноген. Это является причиной развития уробилинурии при паренхиматозной желтухе.
Избыточное образование в кишечнике стеркобилиногена наблюдается при усиленном гемолизе эритроцитов.
Отсутствие уробилиноидов – полное нарушение поступления желчи в кишечник.
Клиническое значение
Увеличение наблюдается при гемолитических анемиях, злокачественных анемиях, маляриях.
Значительное увеличение происходит при инфекционных и токсических гепатитах, других заболеваниях печени, холангитах, гемолитических желтухах, гемолитических анемиях, циррозах, сердечной недостаточности, инфекционном мононуклеозе.
Уменьшение отмечается при холелитиазе, приеме лекарственных препаратов (сульфаниламиды, антибиотики).Порфирины
Порфирины – промежуточные продукты синтеза гема (небелковая часть гемоглобина). Они образуются из аминокислоты глицина и производного янтарной кислоты – сукцинин-коэнзима А. Основные количества порфиринов синтезируются в костном мозге (для образования гема) и печени (для синтеза окислительно-восстановительных ферментов, гема, миоглобинов, миелина костной и других тканей). В норме с мочой выделяются небольшие количества урои копропорфиринов.
Клиническое значение
Принято различать первичные и вторичные порфиринурии.
К первым относят группу наследственных заболеваний, для каждого из которых характерен набор экскретируемых с мочой порфиринов и их предшественников. Вторичные порфиринурии возникают вследствие нарушения функции печени или кроветворных органов в результате каких-либо первичных заболеваний, например тяжелых гепатитов, интоксикаций свинцом, фосфором, алкоголем, бензолом, при некоторых злокачественных опухолях и аллергических состояниях, циррозах печени и т. п. При вторичных порфиринуриях в моче обнаруживаются значительные количества копропорфиринов.Обнаружение гемоглобина
При наличии в моче большого количества крови говорят о макрогематурии; небольшая примесь крови – микрогематурия – определяется микроскопическим исследованием (в осадке обнаруживают эритроциты) или с помощью химических методов. Гемоглобин выявляют при помощи реакций:
1) с гваяковой кислотой;
2) с амидопирином;
3) бензидином.
Для экспресс-анализа используют реактивные таблетки или тест-полоски.
Микроскопия мочевого осадкаВсе осадки, встречающиеся в моче, разделяют на две группы: организованные и неорганизованные. Организованные осадки отличаются от неорганизованных своей нерастворимостью при нагревании в уксусной и соляной кислотах; обладая сравнительно низкой относительной плотностью, они значительно медленнее оседают на дно сосуда, и моча долго остается мутной.
Организованные осадки
Эритроциты
Эритроциты имеют дискообразную форму, окрашены в желто-зеленый цвет, по размеру меньше лейкоцитов, цитоплазма лишена зернистости и ядра. Характерный признак – наличие двойного контура, который можно увидеть при фокусировке микровинтом. Длительное пребывание эритроцитов в моче низкой относительной плотности приводит к потере гемоглобина, и они имеют вид одноили двухконтурных колец (клетки-тени). В концентрированной моче эритроциты могут приобретать звездчатую форму.
Дифференцировать эритроциты приходится с дрожжевыми клетками, кристаллами оксалатов круглой формы и каплями жира. Дрожжевые грибы, в отличие от эритроцитов, чаще бывают овальной формы, резче преломляют свет. Прибавление к препарату осадка одной капли 5 %-ной уксусной кислоты приводит к гемолизу эритроцитов, оставляя грибы и оксалаты без изменения. Масляные капельки различны по размеру и преломляют свет.
Клиническое значение. Гематурия может наблюдаться при поражении паренхимы почки (гломерулонефрит, пиелонефрит, опухоли, туберкулез и т. д.), при тяжелой физической нагрузке, поражении мочевыводящих путей (почечных лоханок, мочеточников, мочевого пузыря, уретры), геморрагических диатезах.
Лейкоциты
Лейкоциты в моче встречаются в виде зернистых клеток, обычно небольшой величины и правильной круглой формы, они могут быть похожими на малые эпителиальные клетки. В моче, имеющей кислую реакцию, свою форму они сохраняют, но теряют зернистость, в цитоплазме четко просматриваются полиморфные ядра; в слабокислой моче зернистость в лейкоцитах хорошо выражена, поэтому ядра просматриваются хуже; при щелочной реакции мочи лейкоциты набухают, становятся стекловидными, хотя ядра еще заметны; в дальнейшем клетки увеличиваются в размерах, утрачивают контур, их цитоплазма разрушается, становятся видны только свободные ядра.